Экзосома (комплекс)

Поделись знанием:
Перейти к: навигация, поиск
Эта статья — о внутриклеточном белковом комплексе, участвующем в процессинге РНК. О внеклеточных везикулах, выделяемых в межклеточное пространство см. экзосомы.

Экзосо́ма (ко́мплекс), или PM/Scl-ко́мплекс — мультибелковый комплекс[en]*, способный к разрушению различных типов молекул РНК. Экзосомы имеются у эукариот и архей, в то время как у бактерий сходные функции выполняет более просто устроенный комплекс — деградосома.

Коровую (центральную) часть экзосомы составляет шестичленное кольцо, к которому прикрепляются другие белки. У эукариот экзосомы присутствуют в цитоплазме, ядре и особенно ядрышке, хотя в этих компартментах имеются некоторые белки, взаимодействующие с экзосомами и регулирующие их активность по деградации РНК-субстратов, специфичных для этих клеточных компартментов. К субстратам экзосомного комплекса относят мРНК, рРНК и многие другие виды малых РНК. Экзосома обладает экзорибонуклеолитической активностью, то есть разрушает молекулы РНК, начиная с одного их конца (3′-конца), а у эукариот для неё характерна также эндорибонуклеолитическая активность, то есть она способна разрезать РНК в местах (сайтах), расположенных во внутренней части молекулы.

Несколько экзосомных белков являются мишенями аутоантител у пациентов, страдающих от специфических аутоиммунных заболеваний, особенно склеромиозита[en]; кроме того, функционирование экзосом блокируется при некоторых видах противораковой антиметаболической химиотерапии. Наконец, мутации в экзосомном компоненте 3[en] вызывают мостомозжечковую гипоплазию[en] и расстройства двигательных нейронов[en] в спинном мозге.





История открытия

Экзосома впервые была описана в 1997 году как РНКаза почкующихся дрожжей Saccharomyces cerevisiae[1]. Вскоре, в 1999 году, было установлено, что экзосома дрожжей эквивалентна уже описанным к тому моменту комплексам PM/Scl человека, которые несколькими годами ранее были изначально описаны как аутоантиген у пациентов с некоторыми аутоиммунными расстройствами[2]. Выделение таких человеческих PM/Scl-комплексов позволило идентифицировать другие экзосомные белки и, наконец, описать все компоненты комплекса[3][4]. В 2001 году увеличивающийся объём геномных данных позволил предсказать наличие экзосомных белков у архей, хотя первый экзосомный комплекс был выделен у архей лишь два года спустя[5][6].

Структура

Коровые белки

Коровая (центральная) часть комплекса имеет кольцевую структуру и состоит из 6 белков, каждый из которых принадлежит к одному и тому же классу РНКаз — белкам, подобным РНКазе РН[en][7]. У архей имеются два различных белка, подобных РНКазам РН — Rrp41 и Rrp42, каждый из которых трижды встречается в кольце и перемежается с белком другого вида. У эукариот кольцевая структура образована шестью различными белками[8][9]. Из шести эукариотических белков три белка напоминают белок Rrp41 архей, а три других — Rrp42[10].

Поверх этих кольцевых белков располагаются три белка, содержащих РНК-связывающие[en] домены S1[en]. У двух из трёх этих белков, кроме того, имеется К-гомологичный домен[en][7]. У эукариот все три этих S1-содержащих белка различны, а у архей они представлены белками одного или двух различных видов, хотя во всех случаях к кольцу прикрепляется только три субъединицы[11].

Кольцевая структура экзосомы очень схожа с таковой у РНКазы РН и полинуклеотидфосфорилазы[en] (PNPазы). У бактерий РНКаза РН, участвующая в процессинге тРНК, образует гексамерное кольцо, состоящее из шести идентичных субъединиц[12][13]. В случае PNPазы (фосфоролитического[en] РНК-деградирующего фермента (имеющегося у бактерий, а также у хлоропластов и митохондрий некоторых эукариот) оба домена РНКазы РН, а также S1- и КН-РНК-связывающие домены являются частями одного-единственного белка, который формирует тримерный комплекс, по структуре[en] почти совершенно совпадающий с экзосомой[14]. Из-за высокого сходства и белковых доменов, и структуры эти комплексы считаются эволюционно родственными и имеют одного общего предка[15]. Экзосомные белки, подобные РНКазе РН — RNPаза и РНКаза РН, — входят в семейство РНКазы РН РНКаз и являются фосфоролитическими экзорибонуклеазами, то есть используют неорганический фосфат для удаления нуклеотидов с 3′-конца молекул РНК[7].

Ассоциированные белки

Кроме вышеперечисленных девяти коровых белков, с экзосомами эукариот также часто ассоциированы два других белка. Один из них — Rrp44, гидролитическая РНКаза, которая принадлежит к семейству РНКазы R[en] гидролитических экзорибонуклеаз (использующих воду для разрыва связей между нуклеотидами). Кроме экзорибонуклеотической активности, Rrp44 также может функционировать как эндорибонуклеаза, эту активность проявляет отдельный домен этого белка[16][17]. У дрожжей Rrp44 ассоциирован со всеми экзосомными комплексами и необходим для их функционирования[18]. Хотя у человека имеется белок-гомолог Rrp44, долгое время не было доказательств того, что этот гомолог тоже ассоциирован с экзосомами[7]. Однако в 2010 году было установлено, что у человека существует три гомолога Rrp44 и два из них могут работать вместе с экзосомами. Наиболее вероятно, что эти два белка разрушают различные РНК-субстраты из-за различной локализации в клетке: один — Dis3L1 — локализован в цитоплазме, а другой — Dis3[en] — в ядре[19][20].

Другой белок, часто ассоциированный с экзосомой, — Rrp6 (у дрожжей) или PM/Scl-100 (у человека), как и Rrp44, этот белок является гидролитической экзорибонуклеазой, однако принадлежит к семейству РНКазы D[en][21]. Белок PM/Scl-100 наиболее часто встречается в экзосомных комплексах, локализованных в ядре, однако может входить в состав и цитоплазматических экзосом[22].

Регуляторные белки

Кроме двух вышеназванных белков, прочно связанных с экзосомным комплексом, многие белки взаимодействуют с экзосомами в цитоплазме и ядре клетки. Эти белки, слабо связывающиеся с экзосомами, могут регулировать активность и специфичность экзосомных комплексов. В цитоплазме экзосома взаимодействует с белками, связывающимися с AU-обогащёнными элементами, в том числе KRSP и TTP[en], которые стимулируют или предотвращают деградацию РНК. Ядерные экзосомы связываются с РНК-связывающими белками (в том числе MPP6/Mpp6 и C1D/Rrp47 у человека/дрожжей), которые необходимы для процессинга некоторых субстратов[7].

С экзосомами взаимодействуют не только одиночные белки, но и белковые комплексы. Один из них — цитоплазматический Ski-комплекс, в который входит РНК-хеликаза[en] (Ski2); он участвует в деградации мРНК[23]. В ядре процессинг рРНК и малых ядрышковых РНК при помощи экзосом управляется комплексом TRAMP, который проявляет РНК-хеликазную (Mtr4) и полиаденилирующую (Trf4) активности[24].

Функции

Ферментативные функции

Как было показано выше, в экзосомный комплекс входит много белков с рибонуклеазными доменами. Конкретная природа этих доменов менялась в ходе эволюции от бактериальных комплексов до комплексов архей и эукариот, и различные ферментативные активности утрачивались или приобретались. Экзосома функционирует главным образом как 3′→5′-экзорибонуклеаза, то есть разрушает молекулы РНК начиная с их 3′-конца. Экзорибонуклеазы, входящие в состав экзосомы, могут быть или фосфоролитическими (как белки, подобные РНКазе РН), или, у эукариот, гидролитическими (белки, содержащие домены РНКазы R и D). Фосфоролитические ферменты используют неорганический фосфат для разрыва фосфодиэфирных связей и высвобождения нуклеотиддифосфатов. Гидролитические ферменты используют воду для гидролиза этих связей с высвобождением нуклеотидмонофосфатов.

У архей белок Rrp41 экзосомного комплекса является фосфоролитической экзорибонуклеазой. В кольце присутствуют три копии этого белка, они отвечают за активность комплекса[9]. У эукариот все субъединицы РНКазы РН утратили свою каталитическую активность, то есть коровое кольцо человеческой экзосомы не содержит ни одного активного фермента[25]. Несмотря на утрату каталитической активности, структура кора экзосомы высококонсервативна от архей до людей, подтверждая, что этот комплекс жизненно необходим для функционирования клетки. У эукариот потеря фосфоролитической активности компенсируется наличием гидролитических ферментов, которые у этих организмов обеспечивают рибонуклеазную активность экзосомы[26][25][27].

Как отмечалось выше, гидролитические белки Rrp6 и Rrp44 ассоциированы с экзосомами дрожжей и людей, кроме того, Rrp6 и два различных белка — Dis3 и Dis3L1 — могут связываться с экзосомой на месте дрожжевого белка Rrp44[19][20]. Хотя изначально считалось, что белки, содержащие S1-домен, проявляют 3′→5′-экзорибонуклеазную активность, существование этой активности у этих белков недавно было подвергнуто сомнению, и эти белки могут только играть роль в связывании субстрата с комплексом до деградации[26].

Субстраты

Экзосомы вовлечены в деградацию и процессинг многих РНК, в цитоплазме клетки они вовлечены в круговорот мРНК. Экзосомы могут разрушать мРНК, которые были помечены для деградации из-за содержащихся в них ошибок, через взаимодействие с белками, обеспечивающими нонсенс-опосредованный распад и нон-стоп-распад[en]. С другой стороны, разрушение составляет обязательный этап в жизненном цикле мРНК. Несколько белков, стабилизирующих или дестабилизирующих мРНК через связывание с AU-обогащёнными элементами, расположенными в 3′-нетранслируемой области мРНК, взаимодействуют с экзосомным комплексом[28][29][30]. В ядре экзосомы необходимы для нормального процессинга нескольких видов малых ядерных РНК[31]. Большинство экзосом находится в ядрышке. Здесь они участвуют в процессинге 5,8S рРНК[en] (первая идентифицированная функция экзосом) и некоторых малых ядрышковых РНК[1][31][32].

Хотя большинство клеток имеют и другие ферменты, разрушающие РНК с их 3′- или 5′-конца, экзосомы необходимы для выживания клетки. Если экспрессия экзосомных белков искусственно уменьшается или прекращается, например, путём РНК-интерференции, клетка останавливается в росте и вскоре умирает. Для работы экзосомы необходимы 9 коровых белков и 2 главных ассоциированных с экзосомами белка[34]. У бактерий нет экзосом, однако схожие функции у них выполняет более простой комплекс, содержащий белок RNPазу, — деградосома[35].

Экзосома является главным комплексом, обеспечивающим контроль качества клеточной РНК. В отличие от прокариот, эукариоты имеют высокоактивные системы, контролирующие клеточные РНК и распознающие непроцессированные или неправильно процессированные РНК-белковые комплексы (например, рибосомы) до того, как они покинут ядро. Считается, что эти системы предотвращают участие бракованных комплексов в важных клеточных процессах, например, синтезе белка[36].

Обнаружено, что в эпидермисе экзосомы избирательно разрушают мРНК, кодирующие транскрипционные факторы, вызывающие дифференциацию (в частности фактор транскрипции GRHL3). Благодаря этому обеспечивается способность прогениторных клеток эпидермиса оставаться в недифференцированном состоянии, что необходимо для поддержания их способности к пролиферации[33].

Кроме участия в процессинге, кругообороте и контроле качества РНК, экзосомы играют важную роль в деградации так называемых криптических нестабильных транскриптов[en] (CUT), которые у дрожжей считываются с тысяч локусов[37][38]. Важность этих нестабильных РНК и их деградации остаются неизвестными, однако похожие РНК были выявлены и в человеческих клетках[39].

Клиническое значение

Аутоиммунные заболевания

Экзосомные комплексы оказываются мишенями антител у пациентов, страдающих от различных аутоиммунных заболеваний. Такие аутоантитела встречаются главным образом у людей, страдающих склеромиозитом[en] — аутоиммунным заболеванием, при котором пациенты имеют симптомы склеродермы и полимиозита[en] или дерматомиозита[40]. Наличие аутоантител в плазме крови пациентов можно определить различными методами. В прошлом для этих целей наиболее часто применяли метод двойной иммунодиффузии[en] с использованием экстракта тимуса телят, иммунофлуоресценцию у клеток HEp-2 или иммунопреципитацию человеческих клеточных экстрактов. При иммунопреципитации плазмы крови с плазмой, содержащей антиэкзосомные антитела, происходила преципитация[en] определённого набора белков. Задолго до открытия экзосом такие преципитирующиеся комплексы были названы PM/Scl-комплексами[41]. Иммунофлуоресценция с использованием плазмы крови таких пациентов показывает характерное окрашивание ядра клетки, позволяя выдвинуть предположение, что антиген, распознаваемый аутоантителами, может играть важную роль в синтезе рибосом[42]. Недавно стали доступны рекомбинантные[en] экзосомные белки, которые использовались для разработки линейного иммуноанализа[en] и иммуноферментного анализа (ELISA) для определения наличия этих антител[7].

При таких аутоиммунных заболеваниях антитела направлены главным образом против двух белков экзосомного комплекса: PM/Scl-100 (белок, подобный РНКазе D) и PM/Scl-75 (один из белков кольца, подобных РНКазе РН). Антитела, распознающие эти белки, обнаруживаются у приблизительно 30 % пациентов, страдающих склеромиозитом[43]. Хотя эти два белка являются основными мишенями аутоантител, у этих пациентов могут поражаться другие экзосомные субъединицы и ассоциированные белки (например, C1D[en])[44][45]. В настоящее время наиболее чувствительным методом для обнаружения этих антител является использование пептида, образованного из белка PM/Scl-100, а не целого белка, в качестве антигена для ELISA. С помощью этого метода аутоантитела обнаруживаются у 55 % пациентов со склеромиозитом, однако они могут также быть обнаружены у пациентов, страдающих только от склеродермы, полимиозита или дерматомиозита[46].

Хотя аутоантитела встречаются у пациентов, имеющих признаки нескольких различных аутоиммунных заболеваний, клинические проявления этих заболеваний варьируют очень широко. Наиболее часто наблюдаемые симптомы являются, как правило, типичными симптомами аутоиммунных заболеваний; к числу таких симптомов относят болезнь Рейно, артрит, миозит и склеродерму[47]. Лечение симптоматическое и схоже с лечением других аутоиммунных заболеваний, часто с применением иммуносупрессивных и иммуномодулирующих препаратов[48].

Лечение рака

Показано, что работа экзосом подавляется антиметаболитом 5-фторурацилом — препаратом противораковой химиотерапии. Он является одним из наиболее эффективных лекарств для лечения крупных опухолей. У дрожжей, обработанных 5-фторурацилом, наблюдались дефекты процессинга рРНК, схожие с теми, которые имели место при блокировании активности экзосом молекулярно-биологическими методами. Отсутствие правильного процессинга рРНК смертельно для клеток, чем и объясняется эффективность препарата[49].

Неврологические расстройства

Мутации экзосомного компонента 3 вызывают врождённую болезнь мотонейронов спинного мозга, атрофию мозжечка, прогрессирующую микроцефалию и глубокую отсталость развития, что характерно для мостомозжечковой гипоплазии типа 1В[50].

Номенклатура субъединиц экзосомы

Номенклатура субъединиц экзосомного комплекса[25][51][52][53]
№ Субъединица Домен Человека Дрожжей Археи MW (kD) Ген человека Ген дрожжей
1 Csl4 S1 RBD hCsl4 Csl4p/Ski4p Csl4 21-32 EXOSC1[en] [www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YNL232W YNL232W]
2 Rrp4 S1/KH RBD</span> hRrp4 Rrp4p Rrp4 28-39 EXOSC2[en] [www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YHR069C YHR069C]
3 Rrp40 S1/KH RBD</span> hRrp40 Rrp40p (Rrp4)A 27-32 EXOSC3[en] [www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YOL142W YOL142W]
4 Rrp41 РНКаза PH</span> hRrp41 Rrp41p/Ski6p Rrp41C 26-28 EXOSC4[en] [www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YGR195W YGR195W]
5 Rrp46 РНКаза PH</span> hRrp46 Rrp46p (Rrp41)A,C 25-28 EXOSC5[en] [www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YGR095C YGR095C]
6 Mtr3 РНКаза PH</span> hMtr3 Mtr3p (Rrp41)A,C 24-37 EXOSC6[en] [www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YGR158C YGR158C]
7 Rrp42 РНКаза PH</span> hRrp42 Rrp42p Rrp42 29-32 EXOSC7[en] [www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YDL111C YDL111C]
8 Rrp43 РНКаза PH</span> OIP2 Rrp43p (Rrp42)A 30-44 EXOSC8[en] [www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YCR035C YCR035C]
9 Rrp45 РНКаза PH</span> PM/Scl-75 Rrp45p (Rrp42)A 34-49 EXOSC9[en] [www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YDR280W YDR280W]
10 Rrp6 РНКаза D PM/Scl-100C Rrp6pC n/a 84-100 EXOSC10[en] [www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YOR001W YOR001W]
11 Rrp44 РНКаза R Dis3B,C

Dis3L1B,C

Rrp44p/Dis3pC n/a 105-113 DIS3[en]

DIS3L1

[www.yeastgenome.org/cgi-bin/locus.fpl?locus=YOL021C YOL021C]
  • A У архей несколько белков экзосомы присутствуют во множестве копий (чтобы сформировать полную архитектуру комплекса экзосомы).
  • B У человека в этой позиции комплекса могут находиться два разных белка: либо Dis3L1 (если экзосома находится в цитоплазме), либо Dis3 (если экзосома находится в ядре).
  • C Участвует в рибонуклеазной активности комплекса.

Напишите отзыв о статье "Экзосома (комплекс)"

Примечания

  1. ↑ 1 2 Mitchell P., Petfalski E., Shevchenko A., Mann M., Tollervey D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9390555 The exosome: a conserved eukaryotic RNA processing complex containing multiple 3'-->5' exoribonucleases.] (англ.) // Cell. — 1997. — Vol. 91, no. 4. — P. 457—466. — PMID 9390555. исправить
  2. ↑ Allmang C., Petfalski E., Podtelejnikov A., Mann M., Tollervey D., Mitchell P. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10465791 The yeast exosome and human PM-Scl are related complexes of 3' --> 5' exonucleases.] (англ.) // Genes & development. — 1999. — Vol. 13, no. 16. — P. 2148—2158. — PMID 10465791. исправить
  3. ↑ Brouwer R., Allmang C., Raijmakers R., van Aarssen Y., Egberts W. V., Petfalski E., van Venrooij W. J., Tollervey D., Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11110791 Three novel components of the human exosome.] (англ.) // The Journal of biological chemistry. — 2001. — Vol. 276, no. 9. — P. 6177—6184. — DOI:10.1074/jbc.M007603200. — PMID 11110791. исправить
  4. ↑ Chen C. Y., Gherzi R., Ong S. E., Chan E. L., Raijmakers R., Pruijn G. J., Stoecklin G., Moroni C., Mann M., Karin M. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11719186 AU binding proteins recruit the exosome to degrade ARE-containing mRNAs.] (англ.) // Cell. — 2001. — Vol. 107, no. 4. — P. 451—464. — PMID 11719186. исправить
  5. ↑ Koonin E. V., Wolf Y. I., Aravind L. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11157787 Prediction of the archaeal exosome and its connections with the proteasome and the translation and transcription machineries by a comparative-genomic approach.] (англ.) // Genome research. — 2001. — Vol. 11, no. 2. — P. 240—252. — DOI:10.1101/gr.162001. — PMID 11157787. исправить
  6. ↑ Evguenieva-Hackenberg E., Walter P., Hochleitner E., Lottspeich F., Klug G. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12947419 An exosome-like complex in Sulfolobus solfataricus.] (англ.) // EMBO reports. — 2003. — Vol. 4, no. 9. — P. 889—893. — DOI:10.1038/sj.embor.embor929. — PMID 12947419. исправить
  7. ↑ 1 2 3 4 5 6 Schilders G., van Dijk E., Raijmakers R., Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16939780 Cell and molecular biology of the exosome: how to make or break an RNA.] (англ.) // International review of cytology. — 2006. — Vol. 251. — P. 159—208. — DOI:10.1016/S0074-7696(06)51005-8. — PMID 16939780. исправить
  8. ↑ Lorentzen E., Walter P., Fribourg S., Evguenieva-Hackenberg E., Klug G., Conti E. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15951817 The archaeal exosome core is a hexameric ring structure with three catalytic subunits.] (англ.) // Nature structural & molecular biology. — 2005. — Vol. 12, no. 7. — P. 575—581. — DOI:10.1038/nsmb952. — PMID 15951817. исправить
  9. ↑ 1 2 Shen V., Kiledjian M. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17174886 A view to a kill: structure of the RNA exosome.] (англ.) // Cell. — 2006. — Vol. 127, no. 6. — P. 1093—1095. — DOI:10.1016/j.cell.2006.11.035. — PMID 17174886. исправить
  10. ↑ Raijmakers R., Egberts W. V., van Venrooij W. J., Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12419256 Protein-protein interactions between human exosome components support the assembly of RNase PH-type subunits into a six-membered PNPase-like ring.] (англ.) // Journal of molecular biology. — 2002. — Vol. 323, no. 4. — P. 653—663. — PMID 12419256. исправить
  11. ↑ Walter P., Klein F., Lorentzen E., Ilchmann A., Klug G., Evguenieva-Hackenberg E. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17078816 Characterization of native and reconstituted exosome complexes from the hyperthermophilic archaeon Sulfolobus solfataricus.] (англ.) // Molecular microbiology. — 2006. — Vol. 62, no. 4. — P. 1076—1089. — DOI:10.1111/j.1365-2958.2006.05393.x. — PMID 17078816. исправить
  12. ↑ Ishii R., Nureki O., Yokoyama S. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12746447 Crystal structure of the tRNA processing enzyme RNase PH from Aquifex aeolicus.] (англ.) // The Journal of biological chemistry. — 2003. — Vol. 278, no. 34. — P. 32397—32404. — DOI:10.1074/jbc.M300639200. — PMID 12746447. исправить
  13. ↑ Harlow L. S., Kadziola A., Jensen K. F., Larsen S. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14767080 Crystal structure of the phosphorolytic exoribonuclease RNase PH from Bacillus subtilis and implications for its quaternary structure and tRNA binding.] (англ.) // Protein science : a publication of the Protein Society. — 2004. — Vol. 13, no. 3. — P. 668—677. — DOI:10.1110/ps.03477004. — PMID 14767080. исправить
  14. ↑ Symmons M. F., Jones G. H., Luisi B. F. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11080643 A duplicated fold is the structural basis for polynucleotide phosphorylase catalytic activity, processivity, and regulation.] (англ.) // Structure (London, England : 1993). — 2000. — Vol. 8, no. 11. — P. 1215—1226. — PMID 11080643. исправить
  15. ↑ Lin-Chao S., Chiou N. T., Schuster G. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17514363 The PNPase, exosome and RNA helicases as the building components of evolutionarily-conserved RNA degradation machines.] (англ.) // Journal of biomedical science. — 2007. — Vol. 14, no. 4. — P. 523—532. — DOI:10.1007/s11373-007-9178-y. — PMID 17514363. исправить
  16. ↑ Lebreton A., Tomecki R., Dziembowski A., Séraphin B. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19060886 Endonucleolytic RNA cleavage by a eukaryotic exosome.] (англ.) // Nature. — 2008. — Vol. 456, no. 7224. — P. 993—996. — DOI:10.1038/nature07480. — PMID 19060886. исправить
  17. ↑ Schneider C., Leung E., Brown J., Tollervey D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19129231 The N-terminal PIN domain of the exosome subunit Rrp44 harbors endonuclease activity and tethers Rrp44 to the yeast core exosome.] (англ.) // Nucleic acids research. — 2009. — Vol. 37, no. 4. — P. 1127—1140. — DOI:10.1093/nar/gkn1020. — PMID 19129231. исправить
  18. ↑ Schneider C., Anderson J. T., Tollervey D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17643380 The exosome subunit Rrp44 plays a direct role in RNA substrate recognition.] (англ.) // Molecular cell. — 2007. — Vol. 27, no. 2. — P. 324—331. — DOI:10.1016/j.molcel.2007.06.006. — PMID 17643380. исправить
  19. ↑ 1 2 Staals R. H., Bronkhorst A. W., Schilders G., Slomovic S., Schuster G., Heck A. J., Raijmakers R., Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20531389 Dis3-like 1: a novel exoribonuclease associated with the human exosome.] (англ.) // The EMBO journal. — 2010. — Vol. 29, no. 14. — P. 2358—2367. — DOI:10.1038/emboj.2010.122. — PMID 20531389. исправить
  20. ↑ 1 2 Tomecki R., Kristiansen M. S., Lykke-Andersen S., Chlebowski A., Larsen K. M., Szczesny R. J., Drazkowska K., Pastula A., Andersen J. S., Stepien P. P., Dziembowski A., Jensen T. H. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20531386 The human core exosome interacts with differentially localized processive RNases: hDIS3 and hDIS3L.] (англ.) // The EMBO journal. — 2010. — Vol. 29, no. 14. — P. 2342—2357. — DOI:10.1038/emboj.2010.121. — PMID 20531386. исправить
  21. ↑ Mian I. S. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9241229 Comparative sequence analysis of ribonucleases HII, III, II PH and D.] (англ.) // Nucleic acids research. — 1997. — Vol. 25, no. 16. — P. 3187—3195. — PMID 9241229. исправить
  22. ↑ Raijmakers R., Schilders G., Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15346807 The exosome, a molecular machine for controlled RNA degradation in both nucleus and cytoplasm.] (англ.) // European journal of cell biology. — 2004. — Vol. 83, no. 5. — P. 175—183. — DOI:10.1078/0171-9335-00385. — PMID 15346807. исправить
  23. ↑ Wang L., Lewis M. S., Johnson A. W. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16043509 Domain interactions within the Ski2/3/8 complex and between the Ski complex and Ski7p.] (англ.) // RNA (New York, N.Y.). — 2005. — Vol. 11, no. 8. — P. 1291—1302. — DOI:10.1261/rna.2060405. — PMID 16043509. исправить
  24. ↑ LaCava J., Houseley J., Saveanu C., Petfalski E., Thompson E., Jacquier A., Tollervey D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15935758 RNA degradation by the exosome is promoted by a nuclear polyadenylation complex.] (англ.) // Cell. — 2005. — Vol. 121, no. 5. — P. 713—724. — DOI:10.1016/j.cell.2005.04.029. — PMID 15935758. исправить
  25. ↑ 1 2 3 Liu Q., Greimann J. C., Lima C. D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17174896 Reconstitution, activities, and structure of the eukaryotic RNA exosome.] (англ.) // Cell. — 2006. — Vol. 127, no. 6. — P. 1223—1237. — DOI:10.1016/j.cell.2006.10.037. — PMID 17174896. исправить
  26. ↑ 1 2 Dziembowski A., Lorentzen E., Conti E., Séraphin B. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17173052 A single subunit, Dis3, is essentially responsible for yeast exosome core activity.] (англ.) // Nature structural & molecular biology. — 2007. — Vol. 14, no. 1. — P. 15—22. — DOI:10.1038/nsmb1184. — PMID 17173052. исправить
  27. ↑ Lorentzen E., Conti E. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16285928 Structural basis of 3' end RNA recognition and exoribonucleolytic cleavage by an exosome RNase PH core.] (англ.) // Molecular cell. — 2005. — Vol. 20, no. 3. — P. 473—481. — DOI:10.1016/j.molcel.2005.10.020. — PMID 16285928. исправить
  28. ↑ Lejeune F., Li X., Maquat L. E. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14527413 Nonsense-mediated mRNA decay in mammalian cells involves decapping, deadenylating, and exonucleolytic activities.] (англ.) // Molecular cell. — 2003. — Vol. 12, no. 3. — P. 675—687. — PMID 14527413. исправить
  29. ↑ Wilson M. A., Meaux S., van Hoof A. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17660569 A genomic screen in yeast reveals novel aspects of nonstop mRNA metabolism.] (англ.) // Genetics. — 2007. — Vol. 177, no. 2. — P. 773—784. — DOI:10.1534/genetics.107.073205. — PMID 17660569. исправить
  30. ↑ Lin W. J., Duffy A., Chen C. Y. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17470429 Localization of AU-rich element-containing mRNA in cytoplasmic granules containing exosome subunits.] (англ.) // The Journal of biological chemistry. — 2007. — Vol. 282, no. 27. — P. 19958—19968. — DOI:10.1074/jbc.M702281200. — PMID 17470429. исправить
  31. ↑ 1 2 Allmang C., Kufel J., Chanfreau G., Mitchell P., Petfalski E., Tollervey D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10508172 Functions of the exosome in rRNA, snoRNA and snRNA synthesis.] (англ.) // The EMBO journal. — 1999. — Vol. 18, no. 19. — P. 5399—5410. — DOI:10.1093/emboj/18.19.5399. — PMID 10508172. исправить
  32. ↑ Schilders G., Raijmakers R., Raats J. M., Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16396833 MPP6 is an exosome-associated RNA-binding protein involved in 5.8S rRNA maturation.] (англ.) // Nucleic acids research. — 2005. — Vol. 33, no. 21. — P. 6795—6804. — DOI:10.1093/nar/gki982. — PMID 16396833. исправить
  33. ↑ 1 2 Mistry D. S., Chen Y., Sen G. L. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22770246 Progenitor function in self-renewing human epidermis is maintained by the exosome.] (англ.) // Cell stem cell. — 2012. — Vol. 11, no. 1. — P. 127—135. — DOI:10.1016/j.stem.2012.04.022. — PMID 22770246. исправить
  34. ↑ van Dijk E. L., Schilders G., Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17545563 Human cell growth requires a functional cytoplasmic exosome, which is involved in various mRNA decay pathways.] (англ.) // RNA (New York, N.Y.). — 2007. — Vol. 13, no. 7. — P. 1027—1035. — DOI:10.1261/rna.575107. — PMID 17545563. исправить
  35. ↑ Carpousis A. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12035760 The Escherichia coli RNA degradosome: structure, function and relationship in other ribonucleolytic multienzyme complexes.] (англ.) // Biochemical Society transactions. — 2002. — Vol. 30, no. 2. — P. 150—155. — PMID 12035760. исправить
  36. ↑ Houseley J., LaCava J., Tollervey D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16829983 RNA-quality control by the exosome.] (англ.) // Nature reviews. Molecular cell biology. — 2006. — Vol. 7, no. 7. — P. 529—539. — DOI:10.1038/nrm1964. — PMID 16829983. исправить
  37. ↑ Wyers F., Rougemaille M., Badis G., Rousselle J. C., Dufour M. E., Boulay J., Régnault B., Devaux F., Namane A., Séraphin B., Libri D., Jacquier A. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15935759 Cryptic pol II transcripts are degraded by a nuclear quality control pathway involving a new poly(A) polymerase.] (англ.) // Cell. — 2005. — Vol. 121, no. 5. — P. 725—737. — DOI:10.1016/j.cell.2005.04.030. — PMID 15935759. исправить
  38. ↑ Neil H., Malabat C., d'Aubenton-Carafa Y, Xu Z., Steinmetz L. M., Jacquier A. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19169244 Widespread bidirectional promoters are the major source of cryptic transcripts in yeast.] (англ.) // Nature. — 2009. — Vol. 457, no. 7232. — P. 1038—1042. — DOI:10.1038/nature07747. — PMID 19169244. исправить
  39. ↑ Preker P., Nielsen J., Kammler S., Lykke-Andersen S., Christensen M. S., Mapendano C. K., Schierup M. H., Jensen T. H. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19056938 RNA exosome depletion reveals transcription upstream of active human promoters.] (англ.) // Science (New York, N.Y.). — 2008. — Vol. 322, no. 5909. — P. 1851—1854. — DOI:10.1126/science.1164096. — PMID 19056938. исправить
  40. ↑ Pope J. E. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12410095 Scleroderma overlap syndromes.] (англ.) // Current opinion in rheumatology. — 2002. — Vol. 14, no. 6. — P. 704—710. — PMID 12410095. исправить
  41. ↑ Gelpi C., Algueró A., Angeles Martinez M., Vidal S., Juarez C., Rodriguez-Sanchez J. L. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2199097 Identification of protein components reactive with anti-PM/Scl autoantibodies.] (англ.) // Clinical and experimental immunology. — 1990. — Vol. 81, no. 1. — P. 59—64. — PMID 2199097. исправить
  42. ↑ Targoff I. N., Reichlin M. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3918546 Nucleolar localization of the PM-Scl antigen.] (англ.) // Arthritis and rheumatism. — 1985. — Vol. 28, no. 2. — P. 226—230. — PMID 3918546. исправить
  43. ↑ Raijmakers R., Renz M., Wiemann C., Egberts W. V., Seelig H. P., van Venrooij W. J., Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14872500 PM-Scl-75 is the main autoantigen in patients with the polymyositis/scleroderma overlap syndrome.] (англ.) // Arthritis and rheumatism. — 2004. — Vol. 50, no. 2. — P. 565—569. — DOI:10.1002/art.20056. — PMID 14872500. исправить
  44. ↑ Brouwer R., Vree Egberts W. T., Hengstman G. J., Raijmakers R., van Engelen B. G., Seelig H. P., Renz M., Mierau R., Genth E., Pruijn G. J., van Venrooij W. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11879549 Autoantibodies directed to novel components of the PM/Scl complex, the human exosome.] (англ.) // Arthritis research. — 2002. — Vol. 4, no. 2. — P. 134—138. — PMID 11879549. исправить
  45. ↑ Schilders G., Egberts W. V., Raijmakers R., Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17599775 C1D is a major autoantibody target in patients with the polymyositis-scleroderma overlap syndrome.] (англ.) // Arthritis and rheumatism. — 2007. — Vol. 56, no. 7. — P. 2449—2454. — DOI:10.1002/art.22710. — PMID 17599775. исправить
  46. ↑ Mahler M., Raijmakers R., Dähnrich C., Blüthner M., Fritzler M. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15899056 Clinical evaluation of autoantibodies to a novel PM/Scl peptide antigen.] (англ.) // Arthritis research & therapy. — 2005. — Vol. 7, no. 3. — P. 704—713. — DOI:10.1186/ar1729. — PMID 15899056. исправить
  47. ↑ Mahler M., Raijmakers R. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17643929 Novel aspects of autoantibodies to the PM/Scl complex: clinical, genetic and diagnostic insights.] (англ.) // Autoimmunity reviews. — 2007. — Vol. 6, no. 7. — P. 432—437. — DOI:10.1016/j.autrev.2007.01.013. — PMID 17643929. исправить
  48. ↑ Jablonska S., Blaszczyk M. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9890673 Scleromyositis: a scleroderma/polymyositis overlap syndrome.] (англ.) // Clinical rheumatology. — 1998. — Vol. 17, no. 6. — P. 465—467. — PMID 9890673. исправить
  49. ↑ Lum P. Y., Armour C. D., Stepaniants S. B., Cavet G., Wolf M. K., Butler J. S., Hinshaw J. C., Garnier P., Prestwich G. D., Leonardson A., Garrett-Engele P., Rush C. M., Bard M., Schimmack G., Phillips J. W., Roberts C. J., Shoemaker D. D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14718172 Discovering modes of action for therapeutic compounds using a genome-wide screen of yeast heterozygotes.] (англ.) // Cell. — 2004. — Vol. 116, no. 1. — P. 121—137. — PMID 14718172. исправить
  50. ↑ Wan J., Yourshaw M., Mamsa H., Rudnik-Schöneborn S., Menezes M. P., Hong J. E., Leong D. W., Senderek J., Salman M. S., Chitayat D., Seeman P., von Moers A., Graul-Neumann L., Kornberg A. J., Castro-Gago M., Sobrido M. J., Sanefuji M., Shieh P. B., Salamon N., Kim R. C., Vinters H. V., Chen Z., Zerres K., Ryan M. M., Nelson S. F., Jen J. C. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22544365 Mutations in the RNA exosome component gene EXOSC3 cause pontocerebellar hypoplasia and spinal motor neuron degeneration.] (англ.) // Nature genetics. — 2012. — Vol. 44, no. 6. — P. 704—708. — DOI:10.1038/ng.2254. — PMID 22544365. исправить
  51. ↑ Sloan K. E., Schneider C., Watkins N. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22817747 Comparison of the yeast and human nuclear exosome complexes.] (англ.) // Biochemical Society transactions. — 2012. — Vol. 40, no. 4. — P. 850—855. — DOI:10.1042/BST20120061. — PMID 22817747. исправить
  52. ↑ Houseley J., Tollervey D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19239894 The many pathways of RNA degradation.] (англ.) // Cell. — 2009. — Vol. 136, no. 4. — P. 763—776. — DOI:10.1016/j.cell.2009.01.019. — PMID 19239894. исправить
  53. ↑ Kiss D. L., Andrulis E. D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21068185 The exozyme model: a continuum of functionally distinct complexes.] (англ.) // RNA (New York, N.Y.). — 2011. — Vol. 17, no. 1. — P. 1—13. — DOI:10.1261/rna.2364811. — PMID 21068185. исправить

Литература

  • Schilders G., Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19111178 Biochemical studies of the mammalian exosome with intact cells.] (англ.) // Methods in enzymology. — 2008. — Vol. 448. — P. 211—226. — DOI:10.1016/S0076-6879(08)02611-6. — PMID 19111178. исправить
  • Houseley J., Tollervey D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18211833 The nuclear RNA surveillance machinery: the link between ncRNAs and genome structure in budding yeast?] (англ.) // Biochimica et biophysica acta. — 2008. — Vol. 1779, no. 4. — P. 239—246. — DOI:10.1016/j.bbagrm.2007.12.008. — PMID 18211833. исправить
  • Vanacova S., Stefl R. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17603538 The exosome and RNA quality control in the nucleus.] (англ.) // EMBO reports. — 2007. — Vol. 8, no. 7. — P. 651—657. — DOI:10.1038/sj.embor.7401005. — PMID 17603538. исправить
  • Houseley J., LaCava J., Tollervey D. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16829983 RNA-quality control by the exosome.] (англ.) // Nature reviews. Molecular cell biology. — 2006. — Vol. 7, no. 7. — P. 529—539. — DOI:10.1038/nrm1964. — PMID 16829983. исправить
  • Büttner K., Wenig K., Hopfner K. P. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16968219 The exosome: a macromolecular cage for controlled RNA degradation.] (англ.) // Molecular microbiology. — 2006. — Vol. 61, no. 6. — P. 1372—1379. — DOI:10.1111/j.1365-2958.2006.05331.x. — PMID 16968219. исправить
  • Lorentzen E., Conti E. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16713559 The exosome and the proteasome: nano-compartments for degradation.] (англ.) // Cell. — 2006. — Vol. 125, no. 4. — P. 651—654. — DOI:10.1016/j.cell.2006.05.002. — PMID 16713559. исправить
  • Pruijn G. J. [www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15999107 Doughnuts dealing with RNA.] (англ.) // Nature structural & molecular biology. — 2005. — Vol. 12, no. 7. — P. 562—564. — DOI:10.1038/nsmb0705-562. — PMID 15999107. исправить

Ссылки

  • [www.rcsb.org/pdb/explore/explore.do?structureId=2NN6 Структура человеческой экзосомы в базе данных RCSB Protein Data Bank].
  • [www.rcsb.org/pdb/explore.do?structureId=2JE6 Структура экзосомы архей в базе данных RCSB Protein Data Bank].
  • [www.rcsb.org/pdb/explore.do?structureId=2JEA Структура экзосомы архей, связанной с РНК, в базе данных RCSB Protein Data Bank].
  • [www.rcsb.org/pdb/explore.do?structureId=2HBJ Структура дрожжевого экзосомного белка Rrp6 в базе данных RCSB Protein Data Bank].
  • [www.pdbe.org/emsearch/exosom* 3D-макромолекулярные структуры экзосом в базе данных EM Data Bank (EMDB)].


Отрывок, характеризующий Экзосома (комплекс)

– Ежели бы я знала… – сквозь слезы сказала она. – Я боялась войти.
Он пожал ее руку.
– Не спала ты?
– Нет, я не спала, – сказала княжна Марья, отрицательно покачав головой. Невольно подчиняясь отцу, она теперь так же, как он говорил, старалась говорить больше знаками и как будто тоже с трудом ворочая язык.
– Душенька… – или – дружок… – Княжна Марья не могла разобрать; но, наверное, по выражению его взгляда, сказано было нежное, ласкающее слово, которого он никогда не говорил. – Зачем не пришла?
«А я желала, желала его смерти! – думала княжна Марья. Он помолчал.
– Спасибо тебе… дочь, дружок… за все, за все… прости… спасибо… прости… спасибо!.. – И слезы текли из его глаз. – Позовите Андрюшу, – вдруг сказал он, и что то детски робкое и недоверчивое выразилось в его лице при этом спросе. Он как будто сам знал, что спрос его не имеет смысла. Так, по крайней мере, показалось княжне Марье.
– Я от него получила письмо, – отвечала княжна Марья.
Он с удивлением и робостью смотрел на нее.
– Где же он?
– Он в армии, mon pere, в Смоленске.
Он долго молчал, закрыв глаза; потом утвердительно, как бы в ответ на свои сомнения и в подтверждение того, что он теперь все понял и вспомнил, кивнул головой и открыл глаза.
– Да, – сказал он явственно и тихо. – Погибла Россия! Погубили! – И он опять зарыдал, и слезы потекли у него из глаз. Княжна Марья не могла более удерживаться и плакала тоже, глядя на его лицо.
Он опять закрыл глаза. Рыдания его прекратились. Он сделал знак рукой к глазам; и Тихон, поняв его, отер ему слезы.
Потом он открыл глаза и сказал что то, чего долго никто не мог понять и, наконец, понял и передал один Тихон. Княжна Марья отыскивала смысл его слов в том настроении, в котором он говорил за минуту перед этим. То она думала, что он говорит о России, то о князе Андрее, то о ней, о внуке, то о своей смерти. И от этого она не могла угадать его слов.
– Надень твое белое платье, я люблю его, – говорил он.
Поняв эти слова, княжна Марья зарыдала еще громче, и доктор, взяв ее под руку, вывел ее из комнаты на террасу, уговаривая ее успокоиться и заняться приготовлениями к отъезду. После того как княжна Марья вышла от князя, он опять заговорил о сыне, о войне, о государе, задергал сердито бровями, стал возвышать хриплый голос, и с ним сделался второй и последний удар.
Княжна Марья остановилась на террасе. День разгулялся, было солнечно и жарко. Она не могла ничего понимать, ни о чем думать и ничего чувствовать, кроме своей страстной любви к отцу, любви, которой, ей казалось, она не знала до этой минуты. Она выбежала в сад и, рыдая, побежала вниз к пруду по молодым, засаженным князем Андреем, липовым дорожкам.
– Да… я… я… я. Я желала его смерти. Да, я желала, чтобы скорее кончилось… Я хотела успокоиться… А что ж будет со мной? На что мне спокойствие, когда его не будет, – бормотала вслух княжна Марья, быстрыми шагами ходя по саду и руками давя грудь, из которой судорожно вырывались рыдания. Обойдя по саду круг, который привел ее опять к дому, она увидала идущих к ней навстречу m lle Bourienne (которая оставалась в Богучарове и не хотела оттуда уехать) и незнакомого мужчину. Это был предводитель уезда, сам приехавший к княжне с тем, чтобы представить ей всю необходимость скорого отъезда. Княжна Марья слушала и не понимала его; она ввела его в дом, предложила ему завтракать и села с ним. Потом, извинившись перед предводителем, она подошла к двери старого князя. Доктор с встревоженным лицом вышел к ней и сказал, что нельзя.
– Идите, княжна, идите, идите!
Княжна Марья пошла опять в сад и под горой у пруда, в том месте, где никто не мог видеть, села на траву. Она не знала, как долго она пробыла там. Чьи то бегущие женские шаги по дорожке заставили ее очнуться. Она поднялась и увидала, что Дуняша, ее горничная, очевидно, бежавшая за нею, вдруг, как бы испугавшись вида своей барышни, остановилась.
– Пожалуйте, княжна… князь… – сказала Дуняша сорвавшимся голосом.
– Сейчас, иду, иду, – поспешно заговорила княжна, не давая времени Дуняше договорить ей то, что она имела сказать, и, стараясь не видеть Дуняши, побежала к дому.
– Княжна, воля божья совершается, вы должны быть на все готовы, – сказал предводитель, встречая ее у входной двери.
– Оставьте меня. Это неправда! – злобно крикнула она на него. Доктор хотел остановить ее. Она оттолкнула его и подбежала к двери. «И к чему эти люди с испуганными лицами останавливают меня? Мне никого не нужно! И что они тут делают? – Она отворила дверь, и яркий дневной свет в этой прежде полутемной комнате ужаснул ее. В комнате были женщины и няня. Они все отстранились от кровати, давая ей дорогу. Он лежал все так же на кровати; но строгий вид его спокойного лица остановил княжну Марью на пороге комнаты.
«Нет, он не умер, это не может быть! – сказала себе княжна Марья, подошла к нему и, преодолевая ужас, охвативший ее, прижала к щеке его свои губы. Но она тотчас же отстранилась от него. Мгновенно вся сила нежности к нему, которую она чувствовала в себе, исчезла и заменилась чувством ужаса к тому, что было перед нею. «Нет, нет его больше! Его нет, а есть тут же, на том же месте, где был он, что то чуждое и враждебное, какая то страшная, ужасающая и отталкивающая тайна… – И, закрыв лицо руками, княжна Марья упала на руки доктора, поддержавшего ее.
В присутствии Тихона и доктора женщины обмыли то, что был он, повязали платком голову, чтобы не закостенел открытый рот, и связали другим платком расходившиеся ноги. Потом они одели в мундир с орденами и положили на стол маленькое ссохшееся тело. Бог знает, кто и когда позаботился об этом, но все сделалось как бы само собой. К ночи кругом гроба горели свечи, на гробу был покров, на полу был посыпан можжевельник, под мертвую ссохшуюся голову была положена печатная молитва, а в углу сидел дьячок, читая псалтырь.
Как лошади шарахаются, толпятся и фыркают над мертвой лошадью, так в гостиной вокруг гроба толпился народ чужой и свой – предводитель, и староста, и бабы, и все с остановившимися испуганными глазами, крестились и кланялись, и целовали холодную и закоченевшую руку старого князя.


Богучарово было всегда, до поселения в нем князя Андрея, заглазное именье, и мужики богучаровские имели совсем другой характер от лысогорских. Они отличались от них и говором, и одеждой, и нравами. Они назывались степными. Старый князь хвалил их за их сносливость в работе, когда они приезжали подсоблять уборке в Лысых Горах или копать пруды и канавы, но не любил их за их дикость.
Последнее пребывание в Богучарове князя Андрея, с его нововведениями – больницами, школами и облегчением оброка, – не смягчило их нравов, а, напротив, усилило в них те черты характера, которые старый князь называл дикостью. Между ними всегда ходили какие нибудь неясные толки, то о перечислении их всех в казаки, то о новой вере, в которую их обратят, то о царских листах каких то, то о присяге Павлу Петровичу в 1797 году (про которую говорили, что тогда еще воля выходила, да господа отняли), то об имеющем через семь лет воцариться Петре Феодоровиче, при котором все будет вольно и так будет просто, что ничего не будет. Слухи о войне в Бонапарте и его нашествии соединились для них с такими же неясными представлениями об антихристе, конце света и чистой воле.
В окрестности Богучарова были всё большие села, казенные и оброчные помещичьи. Живущих в этой местности помещиков было очень мало; очень мало было также дворовых и грамотных, и в жизни крестьян этой местности были заметнее и сильнее, чем в других, те таинственные струи народной русской жизни, причины и значение которых бывают необъяснимы для современников. Одно из таких явлений было проявившееся лет двадцать тому назад движение между крестьянами этой местности к переселению на какие то теплые реки. Сотни крестьян, в том числе и богучаровские, стали вдруг распродавать свой скот и уезжать с семействами куда то на юго восток. Как птицы летят куда то за моря, стремились эти люди с женами и детьми туда, на юго восток, где никто из них не был. Они поднимались караванами, поодиночке выкупались, бежали, и ехали, и шли туда, на теплые реки. Многие были наказаны, сосланы в Сибирь, многие с холода и голода умерли по дороге, многие вернулись сами, и движение затихло само собой так же, как оно и началось без очевидной причины. Но подводные струи не переставали течь в этом народе и собирались для какой то новой силы, имеющей проявиться так же странно, неожиданно и вместе с тем просто, естественно и сильно. Теперь, в 1812 м году, для человека, близко жившего с народом, заметно было, что эти подводные струи производили сильную работу и были близки к проявлению.
Алпатыч, приехав в Богучарово несколько времени перед кончиной старого князя, заметил, что между народом происходило волнение и что, противно тому, что происходило в полосе Лысых Гор на шестидесятиверстном радиусе, где все крестьяне уходили (предоставляя казакам разорять свои деревни), в полосе степной, в богучаровской, крестьяне, как слышно было, имели сношения с французами, получали какие то бумаги, ходившие между ними, и оставались на местах. Он знал через преданных ему дворовых людей, что ездивший на днях с казенной подводой мужик Карп, имевший большое влияние на мир, возвратился с известием, что казаки разоряют деревни, из которых выходят жители, но что французы их не трогают. Он знал, что другой мужик вчера привез даже из села Вислоухова – где стояли французы – бумагу от генерала французского, в которой жителям объявлялось, что им не будет сделано никакого вреда и за все, что у них возьмут, заплатят, если они останутся. В доказательство того мужик привез из Вислоухова сто рублей ассигнациями (он не знал, что они были фальшивые), выданные ему вперед за сено.
Наконец, важнее всего, Алпатыч знал, что в тот самый день, как он приказал старосте собрать подводы для вывоза обоза княжны из Богучарова, поутру была на деревне сходка, на которой положено было не вывозиться и ждать. А между тем время не терпело. Предводитель, в день смерти князя, 15 го августа, настаивал у княжны Марьи на том, чтобы она уехала в тот же день, так как становилось опасно. Он говорил, что после 16 го он не отвечает ни за что. В день же смерти князя он уехал вечером, но обещал приехать на похороны на другой день. Но на другой день он не мог приехать, так как, по полученным им самим известиям, французы неожиданно подвинулись, и он только успел увезти из своего имения свое семейство и все ценное.
Лет тридцать Богучаровым управлял староста Дрон, которого старый князь звал Дронушкой.
Дрон был один из тех крепких физически и нравственно мужиков, которые, как только войдут в года, обрастут бородой, так, не изменяясь, живут до шестидесяти – семидесяти лет, без одного седого волоса или недостатка зуба, такие же прямые и сильные в шестьдесят лет, как и в тридцать.
Дрон, вскоре после переселения на теплые реки, в котором он участвовал, как и другие, был сделан старостой бурмистром в Богучарове и с тех пор двадцать три года безупречно пробыл в этой должности. Мужики боялись его больше, чем барина. Господа, и старый князь, и молодой, и управляющий, уважали его и в шутку называли министром. Во все время своей службы Дрон нн разу не был ни пьян, ни болен; никогда, ни после бессонных ночей, ни после каких бы то ни было трудов, не выказывал ни малейшей усталости и, не зная грамоте, никогда не забывал ни одного счета денег и пудов муки по огромным обозам, которые он продавал, и ни одной копны ужи на хлеба на каждой десятине богучаровских полей.
Этого то Дрона Алпатыч, приехавший из разоренных Лысых Гор, призвал к себе в день похорон князя и приказал ему приготовить двенадцать лошадей под экипажи княжны и восемнадцать подвод под обоз, который должен был быть поднят из Богучарова. Хотя мужики и были оброчные, исполнение приказания этого не могло встретить затруднения, по мнению Алпатыча, так как в Богучарове было двести тридцать тягол и мужики были зажиточные. Но староста Дрон, выслушав приказание, молча опустил глаза. Алпатыч назвал ему мужиков, которых он знал и с которых он приказывал взять подводы.
Дрон отвечал, что лошади у этих мужиков в извозе. Алпатыч назвал других мужиков, и у тех лошадей не было, по словам Дрона, одни были под казенными подводами, другие бессильны, у третьих подохли лошади от бескормицы. Лошадей, по мнению Дрона, нельзя было собрать не только под обоз, но и под экипажи.
Алпатыч внимательно посмотрел на Дрона и нахмурился. Как Дрон был образцовым старостой мужиком, так и Алпатыч недаром управлял двадцать лет имениями князя и был образцовым управляющим. Он в высшей степени способен был понимать чутьем потребности и инстинкты народа, с которым имел дело, и потому он был превосходным управляющим. Взглянув на Дрона, он тотчас понял, что ответы Дрона не были выражением мысли Дрона, но выражением того общего настроения богучаровского мира, которым староста уже был захвачен. Но вместе с тем он знал, что нажившийся и ненавидимый миром Дрон должен был колебаться между двумя лагерями – господским и крестьянским. Это колебание он заметил в его взгляде, и потому Алпатыч, нахмурившись, придвинулся к Дрону.
– Ты, Дронушка, слушай! – сказал он. – Ты мне пустого не говори. Его сиятельство князь Андрей Николаич сами мне приказали, чтобы весь народ отправить и с неприятелем не оставаться, и царский на то приказ есть. А кто останется, тот царю изменник. Слышишь?
– Слушаю, – отвечал Дрон, не поднимая глаз.
Алпатыч не удовлетворился этим ответом.
– Эй, Дрон, худо будет! – сказал Алпатыч, покачав головой.
– Власть ваша! – сказал Дрон печально.
– Эй, Дрон, оставь! – повторил Алпатыч, вынимая руку из за пазухи и торжественным жестом указывая ею на пол под ноги Дрона. – Я не то, что тебя насквозь, я под тобой на три аршина все насквозь вижу, – сказал он, вглядываясь в пол под ноги Дрона.
Дрон смутился, бегло взглянул на Алпатыча и опять опустил глаза.
– Ты вздор то оставь и народу скажи, чтобы собирались из домов идти в Москву и готовили подводы завтра к утру под княжнин обоз, да сам на сходку не ходи. Слышишь?
Дрон вдруг упал в ноги.
– Яков Алпатыч, уволь! Возьми от меня ключи, уволь ради Христа.
– Оставь! – сказал Алпатыч строго. – Под тобой насквозь на три аршина вижу, – повторил он, зная, что его мастерство ходить за пчелами, знание того, когда сеять овес, и то, что он двадцать лет умел угодить старому князю, давно приобрели ему славу колдуна и что способность видеть на три аршина под человеком приписывается колдунам.
Дрон встал и хотел что то сказать, но Алпатыч перебил его:
– Что вы это вздумали? А?.. Что ж вы думаете? А?
– Что мне с народом делать? – сказал Дрон. – Взбуровило совсем. Я и то им говорю…
– То то говорю, – сказал Алпатыч. – Пьют? – коротко спросил он.
– Весь взбуровился, Яков Алпатыч: другую бочку привезли.
– Так ты слушай. Я к исправнику поеду, а ты народу повести, и чтоб они это бросили, и чтоб подводы были.
– Слушаю, – отвечал Дрон.
Больше Яков Алпатыч не настаивал. Он долго управлял народом и знал, что главное средство для того, чтобы люди повиновались, состоит в том, чтобы не показывать им сомнения в том, что они могут не повиноваться. Добившись от Дрона покорного «слушаю с», Яков Алпатыч удовлетворился этим, хотя он не только сомневался, но почти был уверен в том, что подводы без помощи воинской команды не будут доставлены.
И действительно, к вечеру подводы не были собраны. На деревне у кабака была опять сходка, и на сходке положено было угнать лошадей в лес и не выдавать подвод. Ничего не говоря об этом княжне, Алпатыч велел сложить с пришедших из Лысых Гор свою собственную кладь и приготовить этих лошадей под кареты княжны, а сам поехал к начальству.

Х
После похорон отца княжна Марья заперлась в своей комнате и никого не впускала к себе. К двери подошла девушка сказать, что Алпатыч пришел спросить приказания об отъезде. (Это было еще до разговора Алпатыча с Дроном.) Княжна Марья приподнялась с дивана, на котором она лежала, и сквозь затворенную дверь проговорила, что она никуда и никогда не поедет и просит, чтобы ее оставили в покое.
Окна комнаты, в которой лежала княжна Марья, были на запад. Она лежала на диване лицом к стене и, перебирая пальцами пуговицы на кожаной подушке, видела только эту подушку, и неясные мысли ее были сосредоточены на одном: она думала о невозвратимости смерти и о той своей душевной мерзости, которой она не знала до сих пор и которая выказалась во время болезни ее отца. Она хотела, но не смела молиться, не смела в том душевном состоянии, в котором она находилась, обращаться к богу. Она долго лежала в этом положении.
Солнце зашло на другую сторону дома и косыми вечерними лучами в открытые окна осветило комнату и часть сафьянной подушки, на которую смотрела княжна Марья. Ход мыслей ее вдруг приостановился. Она бессознательно приподнялась, оправила волоса, встала и подошла к окну, невольно вдыхая в себя прохладу ясного, но ветреного вечера.
«Да, теперь тебе удобно любоваться вечером! Его уж нет, и никто тебе не помешает», – сказала она себе, и, опустившись на стул, она упала головой на подоконник.
Кто то нежным и тихим голосом назвал ее со стороны сада и поцеловал в голову. Она оглянулась. Это была m lle Bourienne, в черном платье и плерезах. Она тихо подошла к княжне Марье, со вздохом поцеловала ее и тотчас же заплакала. Княжна Марья оглянулась на нее. Все прежние столкновения с нею, ревность к ней, вспомнились княжне Марье; вспомнилось и то, как он последнее время изменился к m lle Bourienne, не мог ее видеть, и, стало быть, как несправедливы были те упреки, которые княжна Марья в душе своей делала ей. «Да и мне ли, мне ли, желавшей его смерти, осуждать кого нибудь! – подумала она.
Княжне Марье живо представилось положение m lle Bourienne, в последнее время отдаленной от ее общества, но вместе с тем зависящей от нее и живущей в чужом доме. И ей стало жалко ее. Она кротко вопросительно посмотрела на нее и протянула ей руку. M lle Bourienne тотчас заплакала, стала целовать ее руку и говорить о горе, постигшем княжну, делая себя участницей этого горя. Она говорила о том, что единственное утешение в ее горе есть то, что княжна позволила ей разделить его с нею. Она говорила, что все бывшие недоразумения должны уничтожиться перед великим горем, что она чувствует себя чистой перед всеми и что он оттуда видит ее любовь и благодарность. Княжна слушала ее, не понимая ее слов, но изредка взглядывая на нее и вслушиваясь в звуки ее голоса.
– Ваше положение вдвойне ужасно, милая княжна, – помолчав немного, сказала m lle Bourienne. – Я понимаю, что вы не могли и не можете думать о себе; но я моей любовью к вам обязана это сделать… Алпатыч был у вас? Говорил он с вами об отъезде? – спросила она.
Княжна Марья не отвечала. Она не понимала, куда и кто должен был ехать. «Разве можно было что нибудь предпринимать теперь, думать о чем нибудь? Разве не все равно? Она не отвечала.
– Вы знаете ли, chere Marie, – сказала m lle Bourienne, – знаете ли, что мы в опасности, что мы окружены французами; ехать теперь опасно. Ежели мы поедем, мы почти наверное попадем в плен, и бог знает…
Княжна Марья смотрела на свою подругу, не понимая того, что она говорила.
– Ах, ежели бы кто нибудь знал, как мне все все равно теперь, – сказала она. – Разумеется, я ни за что не желала бы уехать от него… Алпатыч мне говорил что то об отъезде… Поговорите с ним, я ничего, ничего не могу и не хочу…
– Я говорила с ним. Он надеется, что мы успеем уехать завтра; но я думаю, что теперь лучше бы было остаться здесь, – сказала m lle Bourienne. – Потому что, согласитесь, chere Marie, попасть в руки солдат или бунтующих мужиков на дороге – было бы ужасно. – M lle Bourienne достала из ридикюля объявление на нерусской необыкновенной бумаге французского генерала Рамо о том, чтобы жители не покидали своих домов, что им оказано будет должное покровительство французскими властями, и подала ее княжне.
– Я думаю, что лучше обратиться к этому генералу, – сказала m lle Bourienne, – и я уверена, что вам будет оказано должное уважение.
Княжна Марья читала бумагу, и сухие рыдания задергали ее лицо.
– Через кого вы получили это? – сказала она.
– Вероятно, узнали, что я француженка по имени, – краснея, сказала m lle Bourienne.
Княжна Марья с бумагой в руке встала от окна и с бледным лицом вышла из комнаты и пошла в бывший кабинет князя Андрея.


Источник — «http://wiki-org.ru/wiki/index.php?title=Экзосома_(комплекс)&oldid=75112438»